一、細胞因子的概念和分類
細胞因子(Cytokine)是由免疫細胞或非免疫細胞合成和分泌的小分子多肽。天然免疫和特異性免疫的效應階段大部分是由細胞因子介導的。細胞因子作為免疫活性細胞間相互作用的介質(mediator),對免疫應答的發生、調節及效應等均起重要作用。
包括:淋巴因子(Lymphokine)、單核因子(Monokine)、白細胞介素(IL)、集落刺激因子(CSF)、干擾素(IFN)、腫瘤壞死因子(TNF)、趨化因子(Chemokine)、TGFb(Transforminggrowth factor b)超家族、生長因子(Growth factor)。
二、細胞因子的產生
1、由活化的淋巴細胞(特別是Th1、Th2細胞)、活化的單核巨噬細胞、成纖維細胞、血管內皮細胞等產生,
2、由腫瘤細胞,如Jurkat細胞、VWHI-3細胞、骨髓瘤細胞等產生,
3、由通過基因工程技術在工程細胞生產重組細胞因子。自身產生的細胞因子是極少的,所以科研用的細胞因子絕大多數都是通過此途徑來的,而且為了保持其穩定性和方便運輸,往往制作成凍干粉狀。
三、細胞因子的功能
細胞因子常與靶細胞表面特異性受體結合而發揮效應,相當于半抗原,所以也具有種屬特異性。
1、作為天然免疫的介質,具有此種功能的細胞因子是由感染性因子刺激單核巨噬細胞產生的;
2、參與淋巴細胞的活化、生長和分化,這些細胞因子是在T細胞對特異性抗原識別的過程種誘發產生的;
3、在免疫-炎癥反應中,對炎性細胞起調節作用,細胞因子激活T細胞在特異性抗原識別過程中誘發產生的非特異性炎性細胞;
4、刺激未成熟白細胞的生長和分化,此種細胞因子是由被激活的淋巴細胞和其他細胞產生的。一種細胞因子可能表現出一種以上的生物學功能。
四、細胞因子的應用
1、在臨床上的應用:重組細胞因子用于治療各種疾病,如腫瘤、感染、造血功能障礙等;細胞因子抑制劑用于治療炎癥、自身免疫病、移植排斥、休克等;細胞因子檢測用于判斷機體免疫功能,進行疾病的輔助診斷,判斷病程,預后,評價治療效果;重組細胞因子可作為佐劑與疫苗共用,預防感染性疾病;細胞因子基因治療。
2、有些細胞因子是體外細胞培養時必須的營養物質,尤其是目前興起無血清培養基使細胞因子得到更廣泛的應用。
五、重組細胞因子的使用
1、因為它的作用原理,使用時注意種屬特異性。
2、重組:建議在啟用前要把裝有凍干粉的小瓶簡單離心一下。重組在無菌蒸餾水或含0.1 %BSA緩沖水溶液中進行,以濃度為0.1-1.0毫克/毫升為宜,然后再分成若干份并保存于-20度以下,需要時再以適當的緩沖液進一步稀釋。
3、貯存:凍干制劑穩定在2-8度,若長期保存最好以凍干粉的形式保存于-20度。重組后,在2-8 C可以保存一周。為保持更大的穩定性,把重組物分成若干份并保存在-20度到-70度,并避免重復凍結/解凍的循環。